Comment ensemencer un milieu solide par la méthode des stries d'isolement ?

 

par juju27 |

     

Une boîte de Pétri est une boîte en plastique dans laquelle vous allez cultiver vos bactéries.
Pour se faire, vous devez ensemencer ce milieu, c'est-à-dire y déposer des bactéries qui s'y développeront par la suite. Pour réussir cette ensemencement, vous pouvez utiliser la technique des stries.
Elle permet d'obtenir des colonies pures (composées d'un seul type de bactéries) et isolées les unes des autres. Cela vous permettra ainsi de déterminer les différentes bactéries présentes dans l'échantillon analyser.

Quelles sont les fournitures nécessaires ?

  • une boîte de Pétri
  • un milieu solide
  • une anse
  • un prisme
  • un bec bunzen
  • une solution de bactérie

Étapes de réalisation

1.

Désinfectez tout d'abord à l'alcool votre plan de travail.

2.

Allumez le bec bunzen en prenant soin d'obtenir une flamme bleue, afin de stériliser l'air alentour dans un rayon de 10 centimètres.
Il apparaît donc évident que vous ne devez pas vous écarter au delà de ce secteur, faute de quoi vous risqueriez de contaminer votre boîte de Pétri.
Attention de ne pas jouer avec les allumettes, rappelez-vous que vous avez mis de l'alcool sur votre plan de travail ...

3.

Rapprochez de vous la boîte de Pétri tout en la laissant fermée pour le moment.
Essayez le plus possible de ne pas la laissez ouverte dans le but d'éviter toute contamination indésirable.
Inscrivez sur le côté ou le fond de la boîte à quoi correspond le contenu (nom échantillon, concentration ...).

4.

Passez l'anse dans la flamme du bec bunzen jusqu'à ce qu'elle devienne incandescente, dans le but de la stériliser.

5.

Patientez quelques secondes le temps que la température diminue, puis plongez l'anse dans la solution bactérienne.
Faîtes en sorte qu'une gouttelette reste "prisonnière" de la boucle de l'anse. C'est ce volume que vous allez ensemencer sur votre milieu.

6.

Ouvrez la boîte de Pétri, et divisez mentalement celle-ci en 3 parties égales.

7.

Comment ensemencer un milieu solide par la méthode des stries d'isolement ?

Déposez la solution microbienne avec l'anse dans la 1er tiers de la boîte en effectuant des stries dans un mouvement de va-et-vient, en prenant soin de ne pas traverser, creuser ou arracher le milieu.
Vous devez la déposer uniquement en surface.

8.

Refermez la boîte de Pétri, et plongez à nouveau l'anse dans la flamme du bec bunzen jusqu'à l'incandescence.
Patientez quelques secondes, le temps qu'elle refroidisse.

9.

Comment ensemencer un milieu solide par la méthode des stries d'isolement ?

Rouvrez votre boîte de Pétri, et effectuez le même mouvement de stries dans le 2nd tiers de la boîte, en prenant soin de repasser sur l'extrémité de la dernière strie effectuée précédemment sur le 1er tiers, et cela dans le but de "récupérer" sur l'anse de la solution (votre anse étant stérile à la suite de son passage sous la flamme, faire des stries sans récupérer de la solution déjà présente sur la boîte serait inutile).

10.

Refermez la boîte de Pétri.
Plongez à nouveau l'anse dans la flamme du bec jusqu'à incandescence. Patientez quelques secondes le temps qu'elle refroidisse.

11.

Comment ensemencer un milieu solide par la méthode des stries d'isolement ?

Comme précédemment, faîtes des stries dans le 3e et dernier tiers de votre boîte, en prenant grand soin de récupérer de la solution en repassant une seule fois sur l'extrémité de la dernière strie effectuée dans le 2nd tiers.

12.

Une fois vous stries terminées, refermez la boîte de Pétri.
Plongez l'anse dans la flamme du bec bunzen jusqu'à son incandescence, et posez-la sur le prisme.

13.

Votre milieu est ainsi ensemencer avec la solution bactérienne.
Incubez votre boîtes.

14.

Les résultats devraient montrer des colonies multiples et regroupées sur le passage des stries du 1er tiers de la boîte. Puis, dans le 2nd tiers, elles devraient être plus espacées et donc moins nombreuses. Le dernier tiers devrait enfin laisser apparaître des colonies isolées, et pures (ne contenant qu'un seul type de bactérie).
Ces colonies de bactéries pures pourront par la suite être repiquées pour une analyse plus poussée.

Commentaires

guelphy | 27/02/2010  

je ne suis pas membre mais j'aimerai que vous m'envoyiez des infos sur les analyses au laboratoire je soutien sur un theme:infection urinaire chez l'enfant(bacteries respensables)

Sur le même thème

jennifer568

Comment se produit une éclipse solaire ?

Dès qu'il se produit une éclipse solaire, nous sommes tous à nos fenêtres parés de nos lunettes mais savez vous de quel manière elles se produisent ?

superbetty-boop

Comment en savoir plus sur le beurre karité ?

Que connait-on finalement sur le beurre de karité ? Le karité, appelé wolof « l'arbre à beurre », pousse dans les savanes boisées, sur les pentes des collines ou sur les plateaux de toute l'Afrique de l'ouest. Cet arbre est particulièrement proté

Fabrice MVondo

Comment faire de la lumière avec du quartz ?

Le quartz est une pierre piézo-électrique qui peut produire une petite lumière si elle soumise à une pression physique ou un stress. Théoriquement, cela est causé par la capacité de la pierre à créer de l'électricité à partir de la séparation

Chercher un article sur Comment fait-on

Derniers articles Sciences exactes