Comment réaliser un frottis microbien fixé ?

 

par juju27 |

     

Un frottis microbien consiste à "étaler" sur une lame de verre, un échantillon d'une solution ou une colonie bactérienne, afin de pouvoir effectuer par la suite des colorations.
Sa réalisation est assez simple et ne nécessite pas un matériel très élaboré. Toutefois, comme toute manipulation, elle doit être rigoureusement effectuée.

Quelles sont les fournitures nécessaires ?

  • une colonie ou une solution microbienne
  • une lame
  • une lamelle
  • un bec bunzen
  • une pipette Pasteur
  • une anse

Étapes de réalisation

1.

Déposez une goutte d'eau sur une lame de verre à l'aide d'une pipette Pasteur.

2.

Puis, à l'aide d'une anse, re-suspendez une colonie microbienne dans cette goutte d'eau.
Le résultat obtenu doit être homogène. Si des résidus solides persistes, la qualité du frottis ne sera pas satisfaisante.

3.

Si vous ne possédez pas de colonie, déposez directement une goutte de la solution microbienne à analyser.

4.

Ensuite, étalez l'échantillon sur la lame avec l'un des côtés d'une lamelle de verre.
La lamelle ne sert ici qu'à étaler la préparation, et ne doit en aucun cas servir à la recouvrir.

5.

Laissez sécher la lame à l'air libre et à température ambiante quelques minutes.

6.

A présent, vous devez "fixer" le frottis.
Pour se faire, allumer le bec bunzen, et réglez-le, de sorte d'obtenir une flamme jaune.

7.

Saisissez la lame par l'une de ses extrémités, en étant vigilant de bien disposer la face de la lame sur laquelle vous avez placé la colonie et l'eau, vers le haut.

8.

Puis, par un mouvement vertical allant de haut en bas, passez la lame dans la flamme, sans pour autant laisser la lame devenir brûlante.

9.

Laissez-la refroidir quelques secondes, puis renouvelez l'opération.

10.

Votre lame est à présent prête pour être colorer.

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